جافا سكريبت معطلة حاليًا في متصفحك. بعض ميزات هذا الموقع لن تعمل عند تعطيل جافا سكريبت.
سجل بياناتك المحددة والدواء الذي ترغب في تناوله، وسنقوم بمطابقة المعلومات التي تقدمها مع المقالات الموجودة في قاعدة بياناتنا الواسعة، وسنرسل لك نسخة PDF عبر البريد الإلكتروني على الفور.
تعمل حبيبات بان-لان-جين على تخفيف التهاب القولون المزمن المتكرر الناجم عن كبريتات دكستران الصوديوم في الفئران عن طريق تعديل الميكروبات المعوية واستعادة إنتاج GLP-1 المشتق من الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في الأمعاء.
جياو بنغ، 1-3، *لي شي، 4، *تشنغ لين، 3، 5 دوان ليفانغ، 1 غاو تشنغشيان، 2، 5 ديهو، 1 لي جي، 6 لي شياو فنغ، 6 شين شيانغ تشون، 5 شياو هايتاو 21 قسم الصيدلة، مستشفى جامعة بكين شنتشن، شنتشن، جمهورية الصين الشعبية؛ 2 كلية الصيدلة، مركز العلوم الصحية بجامعة شنتشن، شنتشن، جمهورية الصين الشعبية؛ 3 مركز أبحاث الهندسة والتكنولوجيا لتطوير وتطبيق الطب العرقي والطب الصيني التقليدي، وزارة التعليم، مختبر قويتشو الرئيسي للصيدلة، جامعة قويتشو الطبية، قوييانغ، جمهورية الصين الشعبية؛ 4 قسم أمراض الجهاز الهضمي، مستشفى جامعة بكين شنتشن، شنتشن، جمهورية الصين الشعبية؛ 5 كلية الصيدلة، جامعة قويتشو الطبية، المختبر الرئيسي للدولة لوظائف وتطبيقات النباتات الطبية، قوييانغ؛ ٦- قسم طب المختبرات، مستشفى جامعة بكين شنتشن، شنتشن، الصين [email protected] شين شيانغتشون، كلية الصيدلة، جامعة قويتشو الطبية، قويتشو، جمهورية الصين الشعبية، ٥٥٠٠٠٤، البريد الإلكتروني [email protected] الهدف: يُعد العلاج القائم على GLP-1 خيارًا علاجيًا جديدًا لأمراض الأمعاء الالتهابية. حبيبات بان-لان-جين (BLG) هي تركيبة معروفة مضادة للفيروسات من الطب الصيني التقليدي، وتُظهر نشاطًا مضادًا للالتهابات في علاج العديد من الحالات الالتهابية. ومع ذلك، لا يزال تأثيرها المضاد للالتهابات على التهاب القولون وآلية عملها غير واضحين. الطرق: إحداث التهاب القولون المزمن المتكرر الناجم عن كبريتات دكستران الصوديوم (DSS) في الفئران. تم قياس مؤشرات نشاط المرض، والعلامات النسيجية للإصابة، ومستويات السيتوكينات المؤيدة للالتهابات لتقييم التأثير الوقائي لـ BLG. تم توصيف تأثيرات BLG على الميكروبات المعوية والأمعاء من خلال مستويات GLP-1 في الدم ومستويات السيتوكينات في القولون. تم تقييم التعبير الجيني لـ Gcg وGPR41 وGRP43، وتكوين الميكروبات المعوية، ومستويات الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في البراز، وإطلاق GLP-1 من خلايا الظهارة القولونية الأولية للفئران، وإنتاج GLP-1 المشتق من الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة. النتائج: أدى العلاج بـ BLG إلى انخفاض ملحوظ في فقدان الوزن، ومؤشر نشاط المرض، وتقصير القولون، وتلف أنسجة القولون، ومستويات السيتوكينات الالتهابية TNF-α وIL-1β وIL-6 في أنسجة القولون. بالإضافة إلى ذلك، يمكن للعلاج بـ BLG استعادة التعبير الجيني لـ Gcg وGPR41 وGRP43 في القولون ومستويات GLP-1 في مصل فئران التهاب القولون بشكل ملحوظ، وذلك عن طريق زيادة البكتيريا المنتجة للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة مثل Akkermansia وPrevotellaceae_UCG-001، وتقليل وفرة البكتيريا مثل Eubacterium_xylanophilum_group وRuminococcaceae_UCG-014 وIntestinimonas وOscillibacter. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يؤدي العلاج بـ BLG إلى زيادة ملحوظة في مستوى الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في براز فئران التهاب القولون. وفي الوقت نفسه، أظهرت التجارب المخبرية أن مستخلص براز الفئران المعالجة بـ BLG يحفز بشكل كبير إفراز GLP-1 من الخلايا الظهارية القولونية الأولية في الفئران. الاستنتاجات: تشير هذه النتائج إلى أن BLG له تأثير مضاد لالتهاب القولون. يتمتع BLG بإمكانية تطويره كعلاج، جزئيًا على الأقل، من خلال تعديل الميكروبات المعوية واستعادة إنتاج GLP-1 المشتق من الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في الأمعاء. أدوية واعدة لالتهاب القولون المزمن المتكرر. الكلمات المفتاحية: التهاب القولون، حبيبات بان-لان-جين، الميكروبات المعوية، الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة، GLP-1
التهاب القولون التقرحي (UC) هو مرض التهابي مزمن يصيب القولون والمستقيم، ويتسم بالإسهال المتكرر، وآلام البطن، وفقدان الوزن، وبراز دموي مخاطي قيحي.¹ وقد ازداد انتشار التهاب القولون التقرحي مؤخرًا في البلدان التي كانت معدلات الإصابة بها منخفضة سابقًا، بما في ذلك الصين، مع تزايد شعبية أنماط الحياة الغربية.² ويشكل هذا الارتفاع مشكلة كبيرة للصحة العامة، وله آثار خطيرة على قدرة المرضى على العمل ونوعية حياتهم. والجدير بالذكر أن آلية حدوث التهاب القولون التقرحي لا تزال غير واضحة إلى حد كبير، ولكن من المقبول عمومًا أن العوامل الوراثية والبيئية، والميكروبات المعوية، والجهاز المناعي، كلها تساهم في تطور المرض.³ وحتى الآن، لا يوجد علاج شافٍ لالتهاب القولون التقرحي، ويهدف العلاج سريريًا إلى السيطرة على الأعراض، وتحفيز حالة الهدوء والحفاظ عليها، وتعزيز التئام الغشاء المخاطي، والحد من تكرار الإصابة. وتشمل العلاجات التقليدية الأمينوساليسيلات، والكورتيكوستيرويدات، ومثبطات المناعة، والعلاجات البيولوجية. ومع ذلك، لا تستطيع هذه الأدوية تحقيق التأثير المطلوب نظرًا لآثارها الجانبية المتعددة. الآثار الجانبية.4 أظهرت العديد من الدراسات الحديثة أن الطب الصيني التقليدي يتمتع بإمكانات كبيرة في المساعدة على تخفيف التهاب القولون التقرحي مع سمية منخفضة، مما يشير إلى أن تطوير علاجات جديدة من الطب الصيني التقليدي يمثل استراتيجية علاجية واعدة لالتهاب القولون التقرحي.5-7
حبيبات بانلانجين (BLG) هي مستحضر من الطب الصيني التقليدي يُصنع من المستخلص المائي لجذر بانلانجين.⁸ بالإضافة إلى فعاليته المضادة للفيروسات، يُظهر BLG نشاطًا مضادًا للالتهابات في علاج العديد من الحالات الالتهابية.^9،10 علاوة على ذلك، تم عزل وتحديد الجلوكوزينولات (R,S-جويترين، بروجويترين، إيبيبوروبين، وجلوكوزيد) من المستخلصات المائية لجذر الإيساتيس، والنيوكليوسيدات (هيبوكسانثين، أدينوزين، يوريدين، وجوانوزين)، وقلويدات النيلة مثل النيلة والإنديروبين.^11،12 وقد وثقت دراسات سابقة أن مركبات الأدينوزين واليوريدين والإنديروبين تُظهر تأثيرات قوية مضادة لالتهاب القولون في نماذج حيوانية مختلفة لالتهاب القولون.^13-17 ومع ذلك، لم تُجرَ دراسات قائمة على الأدلة لتقييم فعالية BLG في علاج التهاب القولون. في هذه الدراسة، بحثنا في التأثير الوقائي تم دراسة تأثير BLG على التهاب القولون المزمن المتكرر الناجم عن كبريتات دكستران الصوديوم (DSS) في فئران C57BL/6 ووجد أن تناول BLG عن طريق الفم يخفف بشكل كبير من التهاب القولون المزمن المتكرر الناجم عن DSS في الفئران. يرتبط الالتهاب وآلياته التنظيمية بتعديل الميكروبات المعوية واستعادة إنتاج الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1 (GLP-1) المشتق من الأمعاء.
تم شراء حبيبات بيتا لاكتوغلوبولين (خالية من السكر، معتمدة من الهيئة الوطنية للمنتجات الطبية Z11020357؛ شركة بكين تونغ رين تانغ لتطوير التكنولوجيا المحدودة، بكين، الصين؛ رقم الدفعة: 20110966) من الصيدليات. تم شراء كبريتات دوديسيل الصوديوم (الوزن الجزيئي: 36000-50000 دالتون) من شركة إم بي بيولوجيكالز (سانتا آنا، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء سلفاسالازين (نقاء ≥ 98%)، والهيماتوكسيلين، والإيوسين من شركة سيغما-ألدريتش (سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء مجموعات اختبار ELISA للجينات المضادة ... تم شراؤها من شركة ميرك كيه جي إيه إيه (دارمشتات، ألمانيا).
تم شراء فئران ذكور من سلالة C57BL/6، تتراوح أعمارها بين 6 و8 أسابيع (بوزن 18-22 غرامًا)، من شركة بكين ويتاهي لتكنولوجيا حيوانات المختبرات المحدودة (بكين، الصين)، ووُضعت في بيئة بدرجة حرارة 22 ± 2 درجة مئوية مع دورة ضوئية/مظلمة مدتها 12 ساعة. تم تغذية الفئران بنظام غذائي قياسي للقوارض مع توفير مياه الشرب بشكل حر لمدة أسبوع واحد للتأقلم مع البيئة الجديدة. ثم قُسّمت الفئران عشوائيًا إلى أربع مجموعات: مجموعة التحكم، ومجموعة نموذج DSS، ومجموعة المعالجة بـ SASP (200 ملغم/كغم، عن طريق الفم)، ومجموعة المعالجة بـ BLG (1 غرام/كغم، عن طريق الفم). كما هو موضح في الشكل 1A، ووفقًا لدراستنا السابقة، تم تحفيز التهاب القولون المزمن المتكرر تجريبيًا في الفئران من خلال ثلاث دورات من DSS بتركيز 1.8% لمدة 5 أيام، تليها مياه مقطرة لمدة 7 أيام.¹⁸ تم علاج الفئران في مجموعتي SASP وBLG بـ SASP وBLG، على التوالي، في كل دورة. بدءًا من اليوم صفر. وفقًا للتجارب الأولية، تم تحديد جرعة BLG عند 1 غ/كغ. في الوقت نفسه، تم تحديد جرعة SASP عند 200 ملغ/كغ وفقًا للمراجع.4 تلقت مجموعتا التحكم ونموذج DSS نفس حجم الماء طوال التجربة.
الشكل 1: يُحسّن بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) التهاب القولون المزمن المتكرر المُستحث بواسطة كبريتات ديكستران الصوديوم (DSS) في الفئران. (أ) التصميم التجريبي لالتهاب القولون المزمن المتكرر والعلاج، (ب) تغير وزن الجسم، (ج) مؤشر نشاط المرض (DAI)، (د) طول القولون، (هـ) صورة نموذجية للقولون، (و) تلوين القولون بصبغة الهيماتوكسيلين والإيوسين (تكبير ×100)، و(ز) النتيجة النسيجية. تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 6). ##p < 0.01 أو ###p < 0.001 مقارنةً بمجموعة التحكم (Con)؛ *p < 0.05 أو **p < 0.01 أو ***p < 0.001 مقارنةً بمجموعة DSS.
تم تسجيل وزن الجسم، وقوام البراز، ونزيف المستقيم يوميًا. تم تحديد مؤشر نشاط المرض (DAI) من خلال دمج درجات وزن الجسم، وقوام البراز، ونزيف المستقيم كما هو موضح سابقًا.¹⁹ في نهاية التجربة، تم قتل جميع الفئران وجمع الدم والبراز والقولون لإجراء المزيد من التجارب.
تم تثبيت نسيج القولون بالفورمالين وتضمينه في البارافين. تم تحضير مقاطع بسمك 5 ميكرون وتلوينها بالهيماتوكسيلين والإيوسين (H&E)، ثم تم إخفاء هوية المرضى وتقييمهم كما هو موضح سابقًا.19
تم استخلاص الحمض النووي الريبوزي الكلي من نسيج القولون باستخدام كاشف تريزول (إنفيتوجين، كارلسباد، كاليفورنيا)، ثم استُخلص الحمض النووي التكميلي باستخدام إنزيم النسخ العكسي (تاكارا، كوساتسو، شيغا، اليابان). أُجري تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي باستخدام نظام تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي مع صبغة SYBR Green Master (روش، بازل، سويسرا). تم توحيد نسخ الجينات المستهدفة بالنسبة إلى جين بيتا-أكتين، وحُللت البيانات باستخدام طريقة 2-ΔΔCT. تظهر تسلسلات بادئات الجينات في الجدول 1.
تم عزل وزراعة خلايا الظهارة القولونية الأولية للفئران وفقًا للوصف السابق.²⁰ باختصار، تم استئصال قولون فئران تتراوح أعمارها بين 6 و8 أسابيع بعد التضحية بها عن طريق خلع الفقرات العنقية، ثم فُتح القولون طوليًا، وعُولج بمحلول هانكس الملحي المتوازن (HBSS، بدون كالسيوم ومغنيسيوم)، وقُطّع إلى قطع صغيرة يتراوح حجمها بين 0.5 و1 مم. بعد ذلك، هُضمت الأنسجة باستخدام 0.4 ملغم/مل من كولاجيناز XI (سيجما، بول، المملكة المتحدة) في وسط DMEM خالي من الكولاجين، ثم خُضعت للطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة. أُعيد تعليق الراسب في وسط DMEM (مُدعّم بـ 10% من مصل الأبقار الجنيني، و100 وحدة/مل من البنسلين، و100 ميكروغرام/مل من الستربتومايسين) عند 37 درجة مئوية، ثم مُرّر عبر شبكة نايلون (حجم المسام ~250 ميكرومتر). أُخذت عينات من القولون تم وضع الخلايا الظهارية في أطباق ذات قاع زجاجي وحضنت مع حمض الأسيتيك وحمض البروبيونيك وحمض البيوتيريك ومستخلصات براز الفئران لمدة ساعتين عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون.
تم تجانس نسيج القولون باستخدام محلول ملحي فوسفاتي، وتم الكشف عن مستويات السيتوكينات IL-6 وTNF-α وIL-1β في نسيج القولون باستخدام مجموعات اختبار ELISA من Luminex (R&D Systems، مينيابوليس، مينيسوتا، الولايات المتحدة الأمريكية). وبالمثل، تم تحديد مستويات GLP-1 في مصل ووسط زراعة خلايا الظهارة القولونية الأولية للفئران باستخدام مجموعة اختبار ELISA (Bioswamp، ووهان، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة.
تم استخلاص الحمض النووي الكلي من البراز باستخدام مجموعة استخلاص الحمض النووي (تيانجين، الصين). قُيست جودة وكمية الحمض النووي عند نسبتي 260 نانومتر/280 نانومتر و260 نانومتر/230 نانومتر على التوالي. بعد ذلك، وباستخدام كل حمض نووي مستخلص كقالب، استُخدمت البادئات النوعية 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) و806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) لتضخيم منطقتي V3-V4 من جين 16S rRNA في مناطق مختلفة. نُقّيت نواتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام مجموعة استخلاص الجل QIAquick (كياجين، ألمانيا)، وكُمّمت بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي، وسُلسلت باستخدام منصة التسلسل IlluminaMiseq PE300 (شركة Illumina، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). ولتحليل المعلوماتية الحيوية، أُجريت معالجة البيانات وفقًا للبروتوكولات المنشورة سابقًا.^21،22 باختصار، استخدم برنامج Cutadapt (V1.9.1) لتصفية ملفات التعبير الخام. تم تجميع وحدات التصنيف التشغيلي (OTUs) باستخدام UPARSE (الإصدار 7.0.1001) مع حد تشابه بنسبة 97%، وتم استخدام UCHIME لإزالة التسلسلات الكيميرية. تم إجراء تحليل وتصنيف تكوين المجتمع باستخدام مصنف RDP (http://rdp.cme.msu.edu/) استنادًا إلى قاعدة بيانات جينات الحمض النووي الريبوزي SILVA.
تم قياس مستويات الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (حمض الأسيتيك، وحمض البروبيونيك، وحمض البيوتيريك) كما وصفها تاو وآخرون سابقًا، مع بعض التعديلات.23 باختصار، تم تعليق 100 ملغ من البراز أولاً في 0.4 مل من الماء منزوع الأيونات، متبوعًا بـ 0.1 مل من حمض الكبريتيك بنسبة 50٪ و 0.5 مل من حمض 2-إيثيل بيوتيريك (معيار داخلي)، ثم تم تجنيسها وتسخينها عند 4 درجات مئوية. تم وضع العينة في جهاز الطرد المركزي بسرعة 12000 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة C. تم استخلاص الراشح باستخدام 0.5 مل من الإيثر وحقنه في جهاز كروماتوغرافيا الغاز (GC) للتحليل. ولتحليل كروماتوغرافيا الغاز (GC)، تم تحليل العينات باستخدام جهاز كروماتوغرافيا الغاز GC-2010 Plus (شركة شيمادزو) المزود بكاشف تأين اللهب (FID). تم الفصل باستخدام عمود ZKAT-624، بأبعاد 30 متر × 0.53 ملم × 0.3 ميكرومتر (شركة لانتشو تشونغكه أنتاي للتكنولوجيا التحليلية المحدودة، الصين). تم الحصول على البيانات باستخدام برنامج GC solution (شركة شيمادزو). كانت نسبة التجزئة 10:1، وكان غاز النيتروجين هو الغاز الحامل، ومعدل التدفق 6 مل/دقيقة. كان حجم الحقن 1 ميكرولتر. كانت درجة حرارة كل من الحاقن والكاشف 300 درجة مئوية. تم ضبط درجة حرارة الفرن على 140 درجة مئوية. 13.5 دقيقة، ثم تم رفع درجة الحرارة إلى 250 درجة مئوية بمعدل 120 درجة مئوية / دقيقة؛ وتم تثبيت درجة الحرارة لمدة 5 دقائق.
تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM). تم تقييم دلالة البيانات باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) متبوعًا باختبار دنكان للمدى المتعدد. تم استخدام برنامج GraphPad Prism 5.0 (شركة GraphPad Software Inc.، سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية) لجميع الحسابات، واعتُبرت قيمة p < 0.05 ذات دلالة إحصائية.
من المعروف أن التهاب القولون التقرحي مرض مزمن متكرر مصحوب بألم شديد في البطن وإسهال ونزيف. لذلك، تم إحداث التهاب القولون التقرحي المزمن المتكرر في الفئران باستخدام DSS لتقييم فعالية BLG المضادة لالتهاب القولون (الشكل 1أ). بالمقارنة مع المجموعة الضابطة، انخفض وزن الجسم بشكل ملحوظ لدى الفئران في مجموعة نموذج DSS، وارتفع مؤشر نشاط المرض (DAI)، وقد انعكست هذه التغيرات بشكل ملحوظ بعد 24 يومًا من العلاج بـ BLG (الشكل 1ب و1ج). يُعد تقصير القولون سمة مميزة لالتهاب القولون التقرحي. كما هو موضح في الشكلين 1د و1هـ، كان طول قولون الفئران التي تلقت DSS أقصر بشكل ملحوظ، ولكن تم تخفيفه بالعلاج بـ BLG. بعد ذلك، تم إجراء تحليل نسيجي مرضي لتقييم التهاب القولون. أظهرت صور التلوين بالهيماتوكسيلين والإيوسين والنتائج المرضية أن إعطاء DSS أدى إلى تعطيل كبير في بنية القولون وتدمير الغدد المعوية، بينما قلل العلاج بـ BLG بشكل ملحوظ من تدمير الغدد المعوية والنتائج المرضية (الشكل 1و و1ز). والجدير بالذكر، التأثير الوقائي كانت فعالية BLG بجرعة 1 غ/كغ مماثلة لفعالية SASP بجرعة 200 ملغ/كغ. تشير هذه النتائج مجتمعة إلى أن BLG فعال في تقليل شدة التهاب القولون المزمن المتكرر الناجم عن DSS في الفئران.
يُعدّ كلٌّ من TNF-α وIL-1β وIL-6 مؤشرات التهابية مهمة في القولون. وكما هو موضح في الشكل 2أ، أدى DSS إلى زيادة ملحوظة في التعبير الجيني لـ TNF-α وIL-1β وIL-6 في القولون مقارنةً بمجموعة التحكم. ويمكن لإعطاء BLG أن يعكس هذه التغيرات الناتجة عن DSS بشكل ملحوظ. بعد ذلك، استخدمنا تقنية ELISA لتحديد مستويات السيتوكينات الالتهابية TNF-α وIL-1β وIL-6 في أنسجة القولون. وأظهرت النتائج أيضًا أن مستويات TNF-α وIL-1β وIL-6 في القولون قد زادت بشكل ملحوظ في الفئران المعالجة بـ DSS، بينما خفف علاج BLG من هذه الزيادة (الشكل 2ب).
الشكل 2: يثبط بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) التعبير الجيني وإنتاج السيتوكينات الالتهابية TNF-α وIL-1β وIL-6 في قولون الفئران المعالجة بـ DSS. (أ) التعبير الجيني في القولون لـ TNF-α وIL-1β وIL-6؛ (ب) مستويات البروتين في القولون لـ TNF-α وIL-1β وIL-6. تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 4-6). #p < 0.05 أو ##p < 0.01 أو ###p < 0.001 مقارنةً بمجموعة التحكم (Con)؛ *p < 0.05 أو **p < 0.01 مقارنةً بمجموعة DSS.
يُعدّ اختلال التوازن الميكروبي المعوي عاملاً حاسماً في إمراضية التهاب القولون التقرحي.²⁴ وللتحقق مما إذا كان بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) يُعدّل الميكروبات المعوية لدى الفئران المُعالجة بـ DSS، أُجري تسلسل الحمض النووي الريبوزي 16S لتحليل التجمع البكتيري في محتويات الأمعاء. يُظهر مخطط فين أن المجموعات الثلاث تشترك في 385 وحدة تصنيفية تشغيلية (OTUs). في الوقت نفسه، امتلكت كل مجموعة وحدات تصنيفية تشغيلية فريدة (الشكل 3أ). علاوة على ذلك، أظهر مؤشرا تشاو 1 وشانون الموضحان في الشكلين 3ب و3ج انخفاضًا في تنوع التجمع الميكروبي المعوي لدى الفئران المُعالجة بـ BLG، حيث انخفض مؤشر شانون بشكل ملحوظ في هذه المجموعة. استُخدم تحليل المكونات الرئيسية (PCA) وتحليل الإحداثيات الرئيسية (PCoA) لتحديد أنماط التجميع بين المجموعات الثلاث، وأظهرت النتائج أن بنية التجمع الميكروبي لدى الفئران المُعالجة بـ DSS كانت منفصلة بوضوح بعد العلاج بـ BLG (الشكلان 3د و3هـ). تشير هذه البيانات إلى أن العلاج بـ BLG قد أثّر بشكل كبير على بنية التجمع الميكروبي. من الفئران المصابة بالتهاب القولون الناجم عن مادة DSS.
الشكل 3: يُغير بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) تنوع الميكروبات المعوية في الفئران المصابة بالتهاب القولون المُستحث بواسطة ديكستران سلفات الصوديوم (DSS). (أ) مخطط فين لوحدات التصنيف التشغيلي (OTU)، (ب) مؤشر تشاو 1، (ج) مؤشر شانون للثراء، (د) مخطط نتائج تحليل المكونات الرئيسية (PCA) لوحدات التصنيف التشغيلي (OTU)، (هـ) مخطط نتائج تحليل الإحداثيات الرئيسية (PCoA) لوحدات التصنيف التشغيلي (OTU). تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 6). **قيمة p < 0.01 مقارنةً بمجموعة DSS.
لتقييم التغيرات المحددة في الميكروبات المعوية، قمنا بتحليل تركيبها على جميع المستويات التصنيفية. كما هو موضح في الشكل 4أ، كانت الشعب الرئيسية في جميع المجموعات هي Firmicutes وBacteroidetes، تليها Verrucomicrobia. وقد زادت الوفرة النسبية لـ Firmicutes ونسب Firmicutes/Bacteroidetes بشكل ملحوظ في المجتمعات الميكروبية المعوية للفئران المعالجة بـ DSS مقارنةً بالفئران الضابطة، وقد انعكست هذه التغيرات بشكل ملحوظ بعد المعالجة بـ BLG. وعلى وجه الخصوص، أدت المعالجة بـ BLG إلى زيادة ملحوظة في الوفرة النسبية لـ Verrucobacterium في براز الفئران المصابة بالتهاب القولون الناجم عن DSS. على مستوى الأسرة، كانت المجتمعات الميكروبية المعوية تتكون من Lachnospiriaceae وMuribaculaceae وAkkermansiaceae وRuminococcaceae وPrevotellaceae (الشكل 4ب). مقارنةً بمجموعة DSS، أدى استنفاد BLG إلى زيادة وفرة Akkermansiaceae. لكنها قللت من وفرة بكتيريا Lachnospiraceae وRuminococcaceae. والجدير بالذكر أنه على مستوى الجنس، كانت الميكروبات المعوية تتكون من Lachnospira_NK4A136_group وAkkermansia وPrevotellaceae_UCG-001 (الشكل 4C). كما أظهرت هذه النتيجة أن معالجة BLG عكست بشكل فعال اختلال توازن الميكروبات استجابةً لتحدي DSS، والذي تميز بانخفاض في Eubacterium_xylanophilum_group وRuminococcaceae_UCG-014 وIntestinimonas وOscillibacter، وزيادة في Akkermansia وPrevotellaceae_UCG-001.
الشكل 4: يُغير بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) وفرة الميكروبات المعوية في فئران مصابة بالتهاب القولون المُستحث بواسطة ديكستران سلفات الصوديوم (DSS). (أ) وفرة الميكروبات المعوية على مستوى الشعبة؛ (ب) وفرة الميكروبات المعوية على مستوى العائلة؛ (ج) وفرة الميكروبات المعوية على مستوى الجنس. تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 6). #p < 0.05 أو ###p < 0.001 مقارنةً بمجموعة التحكم (Con)؛ *p < 0.05 أو **p < 0.01 أو ***p < 0.001 مقارنةً بمجموعة DSS.
بالنظر إلى أن الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFAs) هي المستقلبات الرئيسية لبكتيريا Akkermansia و Prevotellaceae_UCG-001، وأن الأسيتات والبروبيونات والبيوتيرات هي أكثر الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة وفرة في تجويف الأمعاء، 25-27 لا تزال دراستنا جارية. كما هو موضح في الشكل 5، انخفضت تركيزات الأسيتات والبروبيونات والبيوتيرات في البراز بشكل ملحوظ في المجموعة المعالجة بـ DSS، بينما استطاع العلاج بـ BLG كبح هذا الانخفاض إلى حد كبير.
الشكل 5. يزيد بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) من مستويات الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFAs) في براز الفئران المصابة بالتهاب القولون المُستحث بواسطة كبريتات ديكستران الصوديوم (DSS). (أ) محتوى حمض الخليك في البراز؛ (ب) محتوى حمض البروبيونيك في البراز؛ (ج) محتوى حمض البيوتيريك في البراز. تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 6). #p < 0.05 أو ##p < 0.01 مقارنةً بمجموعة التحكم (Con)؛ *p < 0.05 أو **p < 0.01 مقارنةً بمجموعة DSS.
قمنا كذلك بحساب معامل ارتباط بيرسون بين الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFA) المختلفة على مستوى الجنس والميكروبات المعوية. وكما هو موضح في الشكل 6، ارتبطت بكتيريا أكرمانزيا ارتباطًا إيجابيًا بإنتاج حمض البروبيونيك (معامل ارتباط بيرسون = 0.4866) وحمض البيوتيريك (معامل ارتباط بيرسون = 0.6192). في المقابل، ارتبطت كل من بكتيريا إنتروموناس وأوسيلوباكتر ارتباطًا سلبيًا بإنتاج الأسيتات، بمعاملات ارتباط بيرسون 0.4709 و0.5104 على التوالي. وبالمثل، ارتبطت بكتيريا رومينوكوكاسيا_UCG-014 ارتباطًا سلبيًا بإنتاج حمض البروبيونيك (معامل ارتباط بيرسون = 0.4508) وحمض البيوتيريك (معامل ارتباط بيرسون = 0.5842) على التوالي.
الشكل 6: تحليل ارتباط بيرسون بين الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة المختلفة والميكروبات القولونية. (أ) إنتيروموناس مع حمض الخليك؛ (ب) عصية الارتجاج مع حمض الخليك؛ (ج) أكرمانزيا مقابل حمض البروبيونيك؛ (د) رومينوكوكوس UCG-014 مع حمض البروبيونيك؛ (هـ) أكرمانزيا مع حمض الزبدة؛ (و) رومينوكوكوس UCG-014 مع حمض الزبدة.
الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1 (GLP-1) هو نتاج ما بعد الترجمة لبروتين البروجلوكاجون (Gcg) خاص بنوع الخلية، وله خصائص مضادة للالتهاب.²⁸ كما هو موضح في الشكل 7، أدى DSS إلى انخفاض ملحوظ في التعبير عن mRNA الخاص بـ Gcg. وقد تمكن علاج القولون وBLG من عكس انخفاض Gcg الناتج عن DSS بشكل ملحوظ مقارنةً بمجموعة التحكم (الشكل 7أ). في الوقت نفسه، انخفض مستوى GLP-1 في المصل بشكل ملحوظ في المجموعة المعالجة بـ DSS، وتمكن علاج BLG من منع هذا الانخفاض إلى حد كبير (الشكل 7ب). ولأن الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة تحفز إفراز GLP-1 من خلال تنشيط مستقبلات البروتين G المقترنة 43 (GRP43) ومستقبلات البروتين G المقترنة 41 (GRP41)، فقد فحصنا أيضًا GPR41 وGRP43 في قولون فئران مصابة بالتهاب القولون، ووجدنا أن التعبير عن mRNA الخاص بـ GRP43 في القولون و انخفض GPR41 بشكل ملحوظ بعد التعرض لتحدي DSS، ويمكن أن يؤدي العلاج بـ BLG إلى إنقاذ هذه الانخفاضات بشكل فعال (الشكل 7C وD).
الشكل 7: يزيد بروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) من مستويات GLP-1 في مصل الدم، ومن التعبير الجيني لـ Gcg وGPR41 وGRP43 في القولون لدى الفئران المعالجة بـ DSS. (أ) التعبير الجيني لـ Gcg في نسيج القولون؛ (ب) مستوى GLP-1 في مصل الدم؛ (ج) التعبير الجيني لـ GPR41 في نسيج القولون؛ (د) التعبير الجيني لـ GPR43 في نسيج القولون. تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 5-6). #p < 0.05 أو ##p < 0.01 مقارنةً بمجموعة التحكم (Con)؛ *p < 0.05 مقارنةً بمجموعة DSS.
بما أن العلاج بـ BLG قد يزيد من مستويات GLP-1 في مصل الدم، والتعبير الجيني لـ Gcg في القولون، ومستويات الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في براز الفئران المعالجة بـ DSS، فقد فحصنا تأثير الأسيتات والبروبيونات والبيوتيرات، بالإضافة إلى تأثيرها على إطلاق GLP-1 من خلايا الظهارة القولونية الأولية للفئران، وذلك في فئران المجموعة الضابطة (F-Con)، وفئران التهاب القولون DSS (F-Con-DSS)، وفئران التهاب القولون المعالجة بـ BLG (F-BLG). وكما هو موضح في الشكل 8A، فإن خلايا الظهارة القولونية الأولية للفئران المعالجة بـ 2 مليمول من حمض الأسيتيك، وحمض البروبيونيك، وحمض البيوتيريك على التوالي، حفزت بشكل ملحوظ إطلاق GLP-1، بما يتوافق مع الدراسات السابقة.^29،30 وبالمثل، حفزت جميع مجموعات F-Con وF-DSS وF-BLG (ما يعادل 0.25 غرام من البراز) إطلاق GLP-1 بشكل كبير من خلايا الظهارة القولونية الأولية للفئران. والجدير بالذكر أن كمية GLP-1 التي تم إطلاقها بواسطة كان مستوى GLP-1 في خلايا القولون الظهارية الأولية للفئران المعالجة بـ F-DSS أقل بكثير من مستواه في خلايا القولون الظهارية الأولية للفئران المعالجة بـ F-Con و F-BLG (الشكل 8ب). تشير هذه البيانات إلى أن المعالجة بـ BLG قد أعادت بشكل ملحوظ إنتاج GLP-1 المشتق من الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في الأمعاء.
الشكل 8: الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة المشتقة من بيتا لاكتوغلوبولين تحفز إطلاق الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1 (GLP-1) من خلايا ظهارة القولون الأولية للفئران. (أ) حفز كل من حمض الخليك وحمض البروبيونيك وحمض البيوتيريك إطلاق GLP-1 من خلايا ظهارة القولون الأولية للفئران؛ (ب) حفزت مستخلصات البراز F-Con وF-DSS وF-BLG خلايا ظهارة القولون الأولية للفئران. كمية GLP-1 المُطلقة: وُضعت عينات من خلايا ظهارة القولون في أطباق بتري ذات قاع زجاجي، وعُولجت بـ 2 ملي مول من حمض الخليك وحمض البروبيونيك وحمض البيوتيريك، ومستخلصات البراز F-Con وF-DSS وF-BLG (ما يعادل 0.25 غرام من البراز)، على التوالي. لمدة ساعتين عند درجة حرارة 37 درجة مئوية وتركيز 5% من ثاني أكسيد الكربون. تم قياس كمية GLP-1 المُفرزة من خلايا ظهارية قولونية فأرية أولية باستخدام تقنية ELISA. تُعرض البيانات كمتوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(n = 3). #p < 0.05 أو ##p < 0.01 مقارنةً بالعينة الفارغة أو F-Con؛ *p < 0.05 مقارنةً بـ F-DSS.
الاختصارات: Ace، حمض الأسيتيك؛ Pro، حمض البروبيونيك؛ مع ذلك، حمض الزبدة؛ F-Con، مستخلص برازي من فئران التحكم؛ F-DSS، مستخلص برازي من فئران مصابة بالتهاب القولون؛ F-BLG، من القولون المعالج بـ BLG. مستخلصات برازية من فئران مصابة بالتهاب.
وباعتبارها مرضاً مستعصياً وفقاً لمنظمة الصحة العالمية، فإن التهاب القولون التقرحي أصبح يشكل خطراً عالمياً؛ ومع ذلك، لا تزال الطرق الفعالة للتنبؤ بالمرض والوقاية منه وعلاجه محدودة. لذلك، ثمة حاجة ملحة لاستكشاف وتطوير استراتيجيات علاجية جديدة آمنة وفعالة لالتهاب القولون التقرحي. تُعد مستحضرات الطب الصيني التقليدي خيارًا واعدًا، إذ أثبتت العديد منها فعاليتها في علاج التهاب القولون التقرحي لدى الصينيين على مر القرون، وهي جميعها مواد عضوية بيولوجية ومواد طبيعية غير ضارة في الغالب بالبشر والحيوانات.^31،32 هدفت هذه الدراسة إلى البحث عن مستحضر آمن وفعال من الطب الصيني التقليدي لعلاج التهاب القولون التقرحي، واستكشاف آلية عمله. يُعد BLG تركيبة عشبية صينية معروفة تُستخدم لعلاج الإنفلونزا.^8،33 وقد أظهرت دراسات في مختبرنا ومختبرات أخرى أن النيلة، وهي منتج طبي صيني تقليدي مُصنّع من نفس المادة الخام لـ BLG، تُظهر فعالية كبيرة في علاج التهاب القولون التقرحي لدى البشر والحيوانات.^4،34 ومع ذلك، فإن تأثيرات BLG المضادة لالتهاب القولون وآلية عملها غير واضحة. في هذه الدراسة، تُظهر نتائجنا أن BLG يُخفف بشكل فعال من التهاب القولون الناجم عن DSS. وهو ما يرتبط بتعديل الميكروبات المعوية واستعادة إنتاج GLP-1 المشتق من الأمعاء.
من المعروف أن التهاب القولون التقرحي يتميز بنوبات متكررة مصحوبة بأعراض سريرية نموذجية، مثل فقدان الوزن والإسهال والنزيف الشرجي وتلف الغشاء المخاطي للقولون على نطاق واسع.³⁵ ولذلك، تم إحداث التهاب القولون المزمن المتكرر عن طريق إعطاء ثلاث دورات من محلول ديكستران سلفات الصوديوم (DSS) بتركيز 1.8% لمدة خمسة أيام، تليها سبعة أيام من شرب الماء. وكما هو موضح في الشكل 1ب، يشير تذبذب فقدان الوزن ودرجات مؤشر نشاط المرض (DAI) إلى نجاح إحداث التهاب القولون المزمن المتكرر. أظهرت الفئران في المجموعة المعالجة بـ BLG تحسنًا ملحوظًا بدءًا من اليوم الثامن، والذي كان مختلفًا بشكل كبير عن اليوم الرابع والعشرين. كما لوحظت نفس التغيرات في درجة مؤشر نشاط المرض (DAI)، مما يشير إلى تحسن في الحالة السريرية لالتهاب القولون. وفيما يتعلق بإصابة القولون والحالة الالتهابية، فقد تحسن طول القولون وتلف أنسجة القولون والتعبير الجيني وإنتاج السيتوكينات الالتهابية TNF-α وIL-1β وIL-6 في أنسجة القولون بشكل كبير بعد العلاج بـ BLG. وبشكل عام، تُظهر هذه النتائج بوضوح أن يُعد BLG فعالاً في علاج التهاب القولون المزمن المتكرر في الفئران.
كيف يُمارس بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) تأثيراته الدوائية؟ أظهرت العديد من الدراسات السابقة أن الميكروبات المعوية تلعب دورًا رئيسيًا في إمراضية التهاب القولون التقرحي، وقد برزت العلاجات القائمة على الميكروبيوم والموجهة إليه كاستراتيجية واعدة لعلاج هذا المرض. في هذه الدراسة، أثبتنا أن العلاج بـ BLG أدى إلى تغييرات ملحوظة في تركيبة الميكروبات المعوية، مما يشير إلى أن التأثير الوقائي لـ BLG ضد التهاب القولون الناجم عن ديكستران سلفات الصوديوم (DSS) مرتبط بتعديل الميكروبات المعوية. تتوافق هذه الملاحظة مع فكرة أن إعادة برمجة التوازن الداخلي للميكروبات المعوية يُعد نهجًا مهمًا لفهم فعالية مستحضرات الطب الصيني التقليدي.^36،37 ومن الجدير بالذكر أن بكتيريا أكرمانزيا هي بكتيريا سالبة الغرام ولا هوائية إجبارية تعيش في طبقة المخاط المعوي، حيث تُحلل الميوسينات، وتُنتج حمض البروبيونيك، وتُحفز تمايز الخلايا الكأسية، وتحافظ على سلامة الغشاء المخاطي. وظيفة سلامة الحاجز.26 تشير بيانات سريرية وحيوانية متعددة إلى أن أكرمانزيا مرتبطة ارتباطًا وثيقًا بالغشاء المخاطي السليم،38 والإعطاء الفموي لأنواع أكرمانزيا. يمكن أن يُحسّن بشكل ملحوظ التهاب الغشاء المخاطي.³⁹ تشير بياناتنا الحالية إلى أن الوفرة النسبية لبكتيريا أكرمانزيا تزداد بشكل ملحوظ بعد العلاج بـ BLG. بالإضافة إلى ذلك، فإن بكتيريا Prevotellaceae_UCG-001 هي بكتيريا منتجة للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة.²⁷ أظهرت دراسات متعددة أن بكتيريا Prevotellaceae_UCG-001 وُجدت بوفرة نسبية منخفضة في براز الحيوانات المصابة بالتهاب القولون.^40،41 تُظهر بياناتنا الحالية أيضًا أن العلاج بـ BLG يمكن أن يزيد بشكل ملحوظ من الوفرة النسبية لبكتيريا Prevotellaceae_UCG-001 في قولون الفئران المعالجة بـ DSS. في المقابل، تُعد بكتيريا Oscillibacter بكتيريا محبة للحرارة المعتدلة، لا هوائية إجبارية.⁴² أفاد الباحثون أن الوفرة النسبية لبكتيريا Oscillibacter قد زادت بشكل ملحوظ في فئران التهاب القولون التقرحي، وكانت مرتبطة ارتباطًا إيجابيًا كبيرًا بمستويات IL-6 وIL-1β والدرجات المرضية.^43،44 والجدير بالذكر أن العلاج بـ BLG قلل بشكل ملحوظ من الوفرة النسبية لبكتيريا Oscillibacter في براز في الفئران المعالجة بـ DSS، لوحظ أن البكتيريا المُعدَّلة بواسطة BLG كانت الأكثر إنتاجًا للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFAs). وقد أظهرت العديد من الدراسات السابقة التأثيرات المفيدة المحتملة للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة على التهاب القولون وحماية سلامة الظهارة المعوية.^45،46 كما أظهرت بياناتنا الحالية زيادةً كبيرةً في تركيزات أسيتات وبروبيونات وبيوتيرات الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة في براز الفئران المعالجة بـ DSS والمعالجة بـ BLG. وبناءً على ذلك، تُظهر هذه النتائج بوضوح أن العلاج بـ BLG يُمكن أن يُعزز بشكل فعال إنتاج البكتيريا للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة المُستحثة بواسطة DSS في الفئران المصابة بالتهاب القولون المزمن المتكرر.
يُعدّ GLP-1 هرمونًا معويًا يُنتَج بشكل رئيسي في اللفائفي والقولون، ويلعب دورًا هامًا في تأخير إفراغ المعدة وخفض مستوى سكر الدم بعد تناول الطعام.⁴⁷ تشير الأدلة إلى أن ثنائي ببتيديل ببتيداز-4 (DPP-4)، وهو مُحفِّز لمستقبلات GLP-1، ودواء نانوي مُضاد لـ GLP-1، يُمكنهما تخفيف التهاب الأمعاء بفعالية لدى الفئران.^48-51 كما ورد في دراسات سابقة، ارتبطت التركيزات العالية للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFAs) بمستويات GLP-1 في بلازما الدم لدى البشر والفئران.⁵² تُظهر بياناتنا الحالية أنه بعد العلاج بـ BLG، ارتفعت مستويات GLP-1 في المصل وتعبير mRNA لـ Gcg بشكل ملحوظ. وبالمثل، ازداد إفراز GLP-1 بشكل ملحوظ في مزارع القولون بعد التحفيز بمستخلصات برازية من فئران مصابة بالتهاب القولون مُعالَجة بـ BLG، مقارنةً بالتحفيز بمستخلصات برازية من فئران مصابة بالتهاب القولون مُعالَجة بـ DSS. كيف تؤثر الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة على إطلاق GLP-1؟ (جوين تولهيرست وآخرون). أفادت التقارير بأن الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFA) تحفز إفراز الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1 (GLP-1) عبر مستقبلات GRP43 وGPR41.²⁹ كما تُظهر بياناتنا الحالية أن العلاج ببروتين بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) يزيد بشكل ملحوظ من التعبير الجيني لـ GRP43 وGPR41 في قولون الفئران المعالجة بـ DSS. تشير هذه البيانات إلى أن العلاج بـ BLG يمكن أن يستعيد إنتاج GLP-1 المُحفز بواسطة SCFA عن طريق تنشيط GRP43 وGPR41.
BLG هو دواء طويل الأمد يُصرف بدون وصفة طبية في الصين. تبلغ الجرعة القصوى المسموح بها من بيتا لاكتوغلوبولين (BLG) في فئران كونمينغ 80 غ/كغ، ولم تُلاحظ أي سمية حادة.⁵³ وتتراوح الجرعة الموصى بها حاليًا من بيتا لاكتوغلوبولين (بدون سكر) للبشر بين 9 و15 غ/يوم (3 مرات يوميًا). أظهرت دراستنا أن جرعة 1 غ/كغ من بيتا لاكتوغلوبولين حسّنت التهاب القولون المزمن المتكرر الناجم عن دكستران سلفات الصوديوم (DSS) في الفئران. هذه الجرعة قريبة من جرعة بيتا لاكتوغلوبولين المستخدمة سريريًا. كما وجدت دراستنا أن آلية عمله تتوسط، جزئيًا على الأقل، تغييرات في الميكروبات المعوية، وتحديدًا البكتيريا المنتجة للأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFA)، مثل أكرمانزيا وبريفوتيلاسيا UCG-001، لاستعادة إنتاج الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1 (GLP-1) من الأمعاء. تشير هذه النتائج إلى أن بيتا لاكتوغلوبولين يستحق المزيد من الدراسة كعامل علاجي محتمل لعلاج التهاب القولون السريري. ومع ذلك، لا تزال الآلية الدقيقة التي يُعدّل بها الميكروبات المعوية بحاجة إلى تأكيد من خلال فئران تعاني من نقص في الميكروبات المعوية وعينات براز. زرع البكتيريا.
Ace، حمض الأسيتيك؛ but، حمض البيوتيريك؛ BLG، الباندان؛ DSS، كبريتات دكستران الصوديوم؛ DAI، مؤشر نشاط المرض؛ DPP، ببتيداز ثنائي الببتيديل؛ FID، كاشف التأين اللهبي؛ F-Con، مستخلصات براز الفئران الضابطة؛ F-DSS، مستخلصات براز فئران التهاب القولون DSS؛ F-BLG، مستخلصات براز فئران التهاب القولون المعالجة بـ BLG؛ GLP-1، الببتيد الشبيه بالجلوكاجون-1؛ Gcg، الجلوكاجون؛ كروماتوغرافيا الغاز، كروماتوغرافيا الغاز؛ GRP43، مستقبل البروتين G المقترن 43؛ GRP41، مستقبل البروتين G المقترن 41؛ H&E، الهيماتوكسيلين-إيوزين؛ HBSS، محلول هانكس الملحي المتوازن؛ OTC، OTC؛ PCA، تحليل المكونات الرئيسية؛ PCoA، تحليل الإحداثيات الرئيسية؛ Pro، حمض البروبيونيك؛ SASP، سلفاسالازين؛ SCFA، الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة؛ الطب الصيني، الطب الصيني التقليدي؛ UC، التهاب القولون التقرحي.
تمت الموافقة على جميع البروتوكولات التجريبية من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان التابعة لمركز جامعة بكين شنتشن-هونغ كونغ للعلوم والتكنولوجيا الطبية (شنتشن، الصين) وفقًا للمبادئ التوجيهية المؤسسية ولوائح الحيوانات (رقم الأخلاقيات A2020157).
ساهم جميع المؤلفين بشكل كبير في وضع التصور والتصميم، أو جمع البيانات، أو تحليل البيانات وتفسيرها؛ وشاركوا في صياغة المقالة أو مراجعة المحتوى الفكري المهم بشكل نقدي؛ ووافقوا على تقديم المخطوطة إلى المجلة الحالية؛ ووافقوا في النهاية على النسخة للنشر؛ وهم مسؤولون عن جميع جوانب العمل.
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81560676 و81660479)، ومشروع الدرجة الأولى لجامعة شنتشن (86000000210)، وصندوق لجنة الابتكار العلمي والتكنولوجي في شنتشن (JCYJ20210324093810026)، وصندوق أبحاث العلوم والتكنولوجيا الطبية في مقاطعة قوانغدونغ (A2020157 وA2020272)، وصيدلية جامعة قويتشو الطبية في مقاطعة قويتشو الممولة من المختبر الرئيسي (YWZJ2020-01) ومستشفى جامعة بكين شنتشن (JCYJ2018009).
1. تانغ ب، تشو ج، تشانغ ب، وآخرون. الإمكانات العلاجية للتريبتوليد كعامل مضاد للالتهابات في التهاب القولون التجريبي الناجم عن كبريتات دكستران الصوديوم في الفئران. pre-immune. 2020؛ 11: 592084. doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. كابلان جي جي. العبء العالمي لمرض التهاب الأمعاء: من 2015 إلى 2025. مجلة نات ريف جاستروينتيرول هيباتول. 2015؛ 12: 720-727. doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. بينغ جيه، تشنغ تي تي، لي شيو، وآخرون. القلويدات المشتقة من النباتات: عوامل واعدة لتعديل مسار المرض في داء الأمعاء الالتهابي. علم الأدوية الأولية. 2019؛ 10: 351. doi:10.3389/fphar.2019.00351
٤. شياو هايتينغ، بينغ جي، وين بي، وآخرون. يثبط نبات النيلة الطبيعية الإجهاد التأكسدي في القولون واستجابات الخلايا التائية المساعدة من النوع الأول/النوع السابع عشر في التهاب القولون المستحث بـ DSS في الفئران. مجلة الطب التأكسدي وطول عمر الخلية. ٢٠١٩؛ ٢٠١٩: ٩٤٨٠٩٤٥. doi: 10.1155/2019/9480945
5. تشين م، دينغ ي، تونغ ز. فعالية وسلامة نبات السوفورا فلافيسينس (Sophora flavescens)، وهو دواء عشبي صيني، في علاج التهاب القولون التقرحي: الأدلة السريرية والآليات المحتملة. علم الأدوية الأولية. 2020؛ 11: 603476. doi:10.3389/fphar.2020.603476
٦. كاو فانغ، ليو جي، شا بينشينغ، بان إتش إف. المنتجات الطبيعية: أدوية فعالة تجريبياً لعلاج داء الأمعاء الالتهابي. مجلة الأدوية الحالية. ٢٠١٩؛ ٢٥: ٤٨٩٣-٤٩١٣. doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. تشانغ سي، جيانغ إم، لو إيه. تأملات حول العلاج المساعد لالتهاب القولون التقرحي بالطب الصيني التقليدي. مجلة المراجعة السريرية للحساسية والتحصين. 2013؛ 44: 274-283. doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
٨. لي تشونغتنغ، لي لي، تشين تي تي، وآخرون. فعالية وسلامة حبيبات بانلانجين في علاج الإنفلونزا الموسمية: بروتوكول دراسة لتجربة عشوائية مضبوطة. Trial. ٢٠١٥؛ ١٦: ١٢٦. doi: 10.1186/s13063-015-0645-x